### 猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒使用说明书

产品名称:
通用名：猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒
英文名：Blocking ELISA Kit For Detection of Antibodies to Classical Swine Fever Virus

包装规格:
96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途:
猪瘟是由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的一种高度接触性、出血性和致死性的传染病。其特点是高热和微血管壁变性导致的广泛出血、坏死及梗塞等，并且慢性型表现为纤维素坏死性肠炎。本试剂盒专用于检测猪血清中猪瘟病毒抗体，能够评估猪瘟病毒疫苗的免疫效果。

试剂盒组成:

• 酶标记物：各规格按需提供
• 样品稀释液：各规格按需提供
• 20X浓缩洗涤液：各规格按需提供
• 底物显色液：各规格按需提供
• 终止液：各规格按需提供
• 阳性对照：各规格按需提供
• 阴性对照：各规格按需提供
• 酶标板：各规格按需提供
• 盖板膜：依规格提供
• 自封袋：依规格提供
• 说明书：依规格提供
• 稀释板：依规格提供

储存及有效期:
储存于2～8℃，有效期12个月。开封后的包被板需于2～8℃避光保存，避免受潮，使用期限为2个月。

适用仪器:
使用630nm波长的酶标仪、37℃恒温设备及可调微量移液器。

样品准备:

1. 取动物全血，待凝固后以4000r/min离心10分钟，收集血清；或待血液自然析出后收集血清。血清应清亮，无溶血。
2. 使用样品稀释液按1:1稀释待检血清（例如将100μl血清加入100μl样品稀释液中，然后混匀）。阴、阳性对照不需要稀释。
3. 浓缩洗涤液使用前需恢复至室温溶解沉淀，并使用蒸馏水或去离子水按20倍稀释。遇到结晶需加热使其溶解后使用。

检验方法:

1. 试剂盒使用前置于室温30分钟恢复至室温。
2. 取所需的酶标板条，设置阴性和阳性对照各2孔，其余未用板条需尽快密封并保存在2～8℃。每孔加入300μl工作洗涤液，甩掉后重复洗涤2次，最后一次拍干。
3. 阴、阳性对照孔各加入100μl相应的对照液；样品孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀后盖好盖板膜，置于37℃（建议水浴）避光反应2小时。
5. 甩掉孔内液体，再每孔加入300μl工作洗涤液，重复洗涤5次，最后一次拍干。
6. 每孔加入100μl酶标记物，盖好盖板膜，避光在37℃反应30分钟。
7. 洗涤过程同之前步骤。
8. 每孔加入100μl底物显色液，避光在室温（20～25℃）反应10分钟。
9. 最后每孔加入50μl终止液，混匀后在10分钟内于630nm下测定各孔的吸光值。

参考值:
在实验正常条件下，阴性对照的平均OD值（ODNC）应≥0.6，阳性对照的平均OD值（ODPC）应≤0.5。

检验结果的判定:

1. PI（阻断率）=（1-OD样品/OD阳性）×100%。
2. PI≥40%为阳性；PI<40%为阴性。
3. 如实验结果为阴性，建议补打相应的疫苗。

试验方法的局限性:
本试验仅为定性检测猪血清和血浆中猪瘟病毒抗体，PI值的高低可粗略评估抗体水平强、中、弱。

注意事项:

1. 实验操作应配戴手套及工作衣，严格执行消毒隔离，各类实验废弃物需按传染物处理。
2. 终止液具有腐蚀性，需避免接触皮肤和衣物，若不慎接触请用大量自来水冲洗。
3. 若试剂盒阴阳性对照或酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。
4. 取出酶标板时，需恢复至室温后再开袋，未用完的酶标板应放入有干燥剂的密封袋中保存。
5. 浓缩洗涤液在低温下容易结晶，使用前需恢复至室温完全溶解。
6. 洗涤时确保每孔加满液体，防止孔口有游离酶无法洗净。
7. 用于检测的样品应保持新鲜状态。
8. 试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
9. 不同批次的试剂组分不得混用。

选择AG百家乐的猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒，为您的实验提供可靠保障，确保检测的准确性和效率。我们的产品将为您的实验室带来更高的价值与信任！