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猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒使用说明书 - AG百家乐品牌

来源:程竹锦 日期:2025-02-15

AG百家乐推出的猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法)为科研和兽医诊断提供了可靠的方法。该产品的通用名称为猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒,英文名称为Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)。每盒的包装规格为50T。

猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒使用说明书 - AG百家乐品牌

预期用途:本试剂盒利用实时荧光PCR的原理,进行猪蓝耳病病毒的定性检测,为病毒的诊断及疗效评估提供了重要指导。

原理介绍:试剂盒专门设计了针对猪蓝耳病病毒高度保守区域的特异性引物和探针。在含有目标病毒基因组的反应体系中,PCR反应得以进行并释放荧光信号。通过荧光定量PCR仪实时监测和输出信号,实现检测结果的定性分析。

试剂盒组成

  • PRRSV RT-PCR反应液:875 μL × 1管
  • PRRSV混合酶液:125 μL × 1管
  • PRRSV阳性对照:40 μL × 1管
  • PRRSV阴性对照:40 μL × 1管
  • 说明书:1份
注:阴性对照为灭菌纯水,阳性对照为含有猪蓝耳靶基因的质粒。

储存条件及有效期:试剂盒应避光存放于-20℃以下,避免反复冻融,有效期为12个月。

适用仪器:试剂盒适用于多种实时荧光定量PCR仪,包括ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列等仪器。

样本要求

  • 血液或血清样品:用无菌注射液抽取后置于离心管中待检。
  • 肺脏、淋巴结和脾脏样品:取样20g,加灭菌PBS,研磨成糊状,再稀释。之后以8000rpm在4℃离心10分钟,取上清待检。
  • 需避免标本间交叉污染。
  • 样本可立即检测;如不能立即检测,可在2~8℃条件下冷藏保存;若需长期保存,应冻存于-80℃以下,避免反复冻融。

检验方法:1. 试剂准备:从冰箱取出试剂盒,充分融化混匀,瞬时离心以去除管壁附着的液体。计算所需反应数n,并按反应体系要求配制试剂。2. 样本处理加样:在PCR反应样本管中加入待测标本RNA各5μL,阴性和阳性对照管各加5μL对应对照品,混匀后转移到PCR仪器。4. PCR扩增:将PCR反应管放入实时荧光定量PCR仪,按照设置参数进行扩增。

参考值:阳性对照应显示S型扩增曲线或Ct值≤35,阴性对照Ct值应>38或无Ct值。标本检测结果的判定依据Ct值:

  • 阳性:Ct值≤35;
  • 可疑:Ct值在35~38间,需重复检测;
  • 阴性:Ct值>38或无Ct值。

实验室注意事项

  • 严格按照相关实验室管理规范进行管理。
  • 处理样本时应在0-4℃下操作,避免RNA降解。
  • 避免标本间交叉污染,检测结束后应立即清洁。
  • 对使用的耗材和器具进行无核酶处理。
  • 试剂应在常温下融化混匀后使用,不同批次的试剂不能混用。

AG百家乐不断致力于提供高品质的生物医疗产品,确保检测的准确性和可靠性,为保障动物健康保驾护航。

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